位于馬薩諸塞州劍橋市的Sarepta Therapeutics一直致力于發(fā)現(xiàn)和開發(fā)針對罕見神經(jīng)肌肉疾病的精準(zhǔn)基因療法。該公司日前宣布，其治療杜氏肌營養(yǎng)不良癥（DMD）的在研基因療法AAVrh74.MHCK7.micro-Dystrophin（以下簡稱AAVrh74），在擁有四名DMD患者的臨床試驗中獲得積極結(jié)果。通過免疫組化與免疫印跡檢測，參與試驗的四名患者均顯示出了明顯的微抗肌萎縮蛋白（micro-dystrophin）水平，并獲得了良好的功能性改良結(jié)果，且未出現(xiàn)任何嚴(yán)重不良事件（SAEs）。

DMD是一種嚴(yán)重的遺傳性漸進(jìn)性肌肉萎縮癥，由抗肌萎縮蛋白（dystrophin）基因突變引起，該蛋白主要存在于骨骼肌和心肌細(xì)胞中，也在神經(jīng)細(xì)胞中有表達(dá)，是肌肉細(xì)胞行使正常功能所必需的蛋白。由于致病基因存在于X染色體上，該疾病主要影響男性，通常在3-5歲開始顯現(xiàn)癥狀，表現(xiàn)為進(jìn)行性肌肉退化和無力。肌肉衰弱首先影響臀部、骨盆、大腿和肩膀的肌肉，進(jìn)而影響胳膊、腿部和軀干的肌肉。到青少年時期，患者通常會喪失行走能力，心臟和呼吸肌也受到影響，最終導(dǎo)致過早死亡。DMD是世界范圍內(nèi)最常見的肌營養(yǎng)不良癥，每3500到5000名男嬰中就有1名患者。DMD目前無法治愈，患者平均預(yù)期壽命只有26歲左右。這些患者急需一款有效的療法來幫助他們延長壽命。

Sarepta的在研藥物有望為患者們帶來創(chuàng)新的基因療法選擇。其技術(shù)平臺利用化學(xué)合成的二氨基磷酸酯嗎啉代寡聚物（PMOs）來影響RNA的剪接和轉(zhuǎn)譯過程，從而改變蛋白質(zhì)合成。PMOs能夠與特定的RNA序列相結(jié)合，進(jìn)而影響RNA剪接機(jī)制對RNA序列的識別。DMD患者由于基因突變導(dǎo)致抗肌萎縮蛋白轉(zhuǎn)譯中止，使肌肉細(xì)胞不能正常生成抗肌萎縮蛋白。Sarepta公司研發(fā)的PMOs能夠讓RNA剪接機(jī)制跳過發(fā)生突變的外顯子生成成熟mRNA，雖然這種mRNA轉(zhuǎn)譯產(chǎn)生的蛋白的功能可能有所減弱，但可以在一定程度上彌補(bǔ)抗肌萎縮蛋白缺失帶來的功能缺陷。

▲PMO引導(dǎo)剪接機(jī)制跳過產(chǎn)生突變的外顯子示意圖（圖片來源：Sarepta公司官網(wǎng)）

本次公布的試驗結(jié)果顯示，通過免疫組化測量，所有參與試驗的患者均獲得了明顯的微抗肌萎縮蛋白轉(zhuǎn)譯反應(yīng)，且適當(dāng)?shù)囟ㄎ挥诩∪饧∧?。患者的微抗肌萎縮蛋白陽性纖維的平均基因表達(dá)率達(dá)到了正常對照組的81.2%，且平均肌肉纖維密度達(dá)到了正常對照組的96.0%。通過免疫印跡檢測，所有治療后活檢均獲得了明顯的微抗肌萎縮蛋白表達(dá)水平，其平均值達(dá)到了正常水平的74.3%。最新參與試驗的第四名患者基因表達(dá)情況尤其明顯，使用免疫組化方法測量，其微抗肌萎縮蛋白陽性纖維平均基因表達(dá)率達(dá)到了正常對照組的96.2%，平均纖維密度達(dá)到了160%，而微抗肌萎縮蛋白水平達(dá)到了182.7%。

除此之外，所有患者的血清肌酸激酶（CK）水平顯著降低，CK的平均降低幅度超過87％。且在研究中未觀察到嚴(yán)重不良事件（SAE）。此次公布的試驗數(shù)據(jù)也包括了全部四名患者的基于北極星移動量表（NSAA）及其他評估標(biāo)準(zhǔn)的試驗終點。試驗結(jié)果顯示，所有參與試驗的男童患者NSAA數(shù)值與基線相比平均增長了6.5分，顯示出了明顯的功能性改良結(jié)果。值得注意的是，本次試驗為一次小型無對照試驗，所獲得的積極數(shù)據(jù)還需通過更大規(guī)模的含對照組的試驗來證實。

本次臨床試驗的首席研究員——來自全美兒童醫(yī)院（Nationwide Children’s Hospital）的Jerry Mendell博士說：“這次試驗的目標(biāo)是證實臨床前模型中的各種設(shè)想。試驗結(jié)果顯示，AAVrh74在不同種類肌肉中均顯示出了良好的轉(zhuǎn)染能力，MHCK7啟動子也使微抗肌肉萎縮蛋白在骨骼肌中出現(xiàn)了明顯的表達(dá)，除此之外，CK水平也降低了，試驗也顯示出了良好的安全性。在這次早期試驗中，我們獲得了與臨床前模型近似的明顯效果，顯示出這一新療法有很大的潛力可以緩解疾病惡化。”

▲Sarepta總裁兼首席執(zhí)行官Doug Ingram博士（圖片來源：Sarepta公司官網(wǎng)）

Sarepta總裁兼首席執(zhí)行官Doug Ingram博士說：“這次在新加入試驗的第四位患者身上看到的積極結(jié)果使我們更有信心加速推進(jìn)研發(fā)的進(jìn)程，開展下一步的臨床試驗。我們期望能將這一療法盡快帶給全世界深受疾病折磨的杜氏肌營養(yǎng)不良癥患者。我們計劃與FDA及其他監(jiān)管機(jī)構(gòu)合作，商討進(jìn)一步的發(fā)展計劃。”

我們祝賀此次Sarepta獲得的積極試驗結(jié)果，并期待這一新型基因療法可以早日與患者見面。

參考資料：

[1] Sarepta Therapeutics Announces that at the 23rd International Congress of the World Muscle Society, Jerry Mendell, M.D., Presented Positive Updated Results from the Four Children Dosed in the Gene Therapy Micro-dystrophin Trial to Treat Patients with Duchenne Muscular Dystrophy. Retrieved October 4, 2018, from http://investorrelations.sarepta.com/news-releases/news-release-details/sarepta-therapeutics-announces-23rd-international-congress-world

[2] 基因療法迎突破，有望改變杜氏肌營養(yǎng)不良癥治療. Retrieved October 4, 2018, from https://mp.weixin.qq.com/s/ib7ZgVR_tEoPgNsXH3W9LQ

[2] 基因療法連獲喜訊，F(xiàn)DA取消兩家公司臨床試驗禁令. Retrieved October 4, 2018, from https://mp.weixin.qq.com/s/IWYolT2ZiXS9fel3plsMdQ