2019年2月20日消息，—嵌合抗原受體-T（Chimeric Antigen Receptor-T，CAR-T）細胞療法已經(jīng)在血液瘤病人身上產(chǎn)生了顯著的療效。但是這個領(lǐng)域存在的挑戰(zhàn)之一就是缺乏檢測免疫效應(yīng)細胞表面CARs的簡單有效方法。

圖片來源：Sci Rep

為此，近日來自南加州大學(xué)Keck醫(yī)學(xué)院的研究人員開發(fā)了一種新的基于熒光素酶的方法（研究人員稱之為Topanga試驗）去檢測T細胞表面CARs的表達。這個方法利用了一種叫做Topanga試劑的重組融合蛋白，由CAR靶標的胞外結(jié)構(gòu)域和海洋熒光素酶或者其衍生物組成。

這個方法涉及將表達CAR的細胞與Topanga試劑共同孵育、幾次洗滌以及熒光檢測。這個方法可以檢測基于免疫球蛋白或者非免疫球蛋白抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的CARs。

研究人員還發(fā)現(xiàn)在Topanga試劑上加上一個表位標簽不僅可以實現(xiàn)一步純化過程，還使得這個試劑可以通過流式細胞術(shù)來檢測CARs細胞。同時，包含分泌的Topanga試劑的上清液可以不經(jīng)任何蛋白純化直接用于生物發(fā)光檢測或者是流式細胞術(shù)檢測。

基于此，研究人員認為Topanga試驗是一種高度敏感、高度特異性、方便、實惠而功能齊全的檢測CARs的新方法。

研究人員接下來計劃研究Topanga試驗是否可以用于監(jiān)控CAR T細胞注射到病人體內(nèi)后的擴增和維持。如果可以實現(xiàn)，這不僅可以幫助醫(yī)生找出由于細胞擴增太快可能出現(xiàn)中毒反應(yīng)的病人，還可以幫助病人找出由于CAR-T細胞存在時間太短導(dǎo)致可能癌癥復(fù)發(fā)的病人。（生物谷Bioon.com）

參考資料：

Preet M. Chaudhary et al. A novel luciferase-based assay for the detection of Chimeric Antigen Receptors。Scientific Reports (2019). DOI: 10.1038/s41598-018-38258-z