在一項(xiàng)新的研究中，來自美國(guó)佐治亞大學(xué)的研究人員發(fā)現(xiàn)一種可在爬行動(dòng)物身上使用CRISPR-Cas9基因編輯工具的方法。相關(guān)研究結(jié)果近期發(fā)表在bioRxiv預(yù)印版服務(wù)器上，論文標(biāo)題為“CRISPR-Cas9 Gene Editing in Lizards Through Microinjection of Unfertilized Oocytes”。在這篇論文中，他們描述了他們開發(fā)的這種技術(shù)，以及它在測(cè)試的蜥蜴中的效果。

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隨著科學(xué)家們?cè)噲D更多地了解CRISPR-Cas9本身、它的工作機(jī)制及其潛在的應(yīng)用，它已被用于各種各樣的實(shí)驗(yàn)。不過，在早期，科學(xué)家們認(rèn)為CRISPR不能與爬行動(dòng)物一起使用，這是因?yàn)榕佬袆?dòng)物具有獨(dú)特的生殖系統(tǒng)---比如，雌性蜥蜴儲(chǔ)存精子，僅在最方便的使用加以使用，這就使得注射CRISPR-Cas9工具較為困難（如果不是不可能的話）。此外，還存在將針插入卵殼而不損壞它和阻止胚胎發(fā)育的問題。但是，存在困難并未意味著不可能，正如這些研究人員發(fā)現(xiàn)的那樣，他們開發(fā)出一種成功的解決方法：利用CRISPR-Cas9對(duì)幾只蜥蜴中的細(xì)胞進(jìn)行基因編輯。

為了在蜥蜴中使用CRISPR-Cas9，這些研究人員切開了幾只測(cè)試的雌性蜥蜴并在受精前將這種編輯工具直接注射到卵子中，同時(shí)這些卵子仍然存在于母體的卵巢中，然后順其自然發(fā)育?？傊麄儗⑦@種編輯工具注射到21只蜥蜴的146個(gè)卵子中。在他們的實(shí)驗(yàn)中，CRISPR-Cas9經(jīng)編程后對(duì)酪氨酸酶編碼基因進(jìn)行編輯，其中這個(gè)基因負(fù)責(zé)確定蜥蜴的顏色---當(dāng)它受到失活時(shí)，蜥蜴將患上白化?。╝lbino）。他們報(bào)道，這種編輯技術(shù)成功了四次---4只患有白化病的蜥蜴出生了。他們指出他們的技術(shù)應(yīng)當(dāng)也適用于其他種類的蜥蜴。

在仔細(xì)研究患上白化病的蜥蜴中實(shí)際發(fā)生的情形之后，這些研究人員發(fā)現(xiàn)這些蜥蜴后代具有來自父本和母本的經(jīng)過編輯的基因---這意味著CRISPR-Cas9在雌性蜥蜴中保持活性的時(shí)間比預(yù)期中的要長(zhǎng)，從而導(dǎo)致父本基因在受精后的變化已經(jīng)發(fā)生了。

參考資料：

Ashley M. Rasys et al. CRISPR-Cas9 Gene Editing in Lizards Through Microinjection of Unfertilized Oocytes. bioRxiv, 2019, doi:10.1101/591446.