單純皰疹病毒
一、生物學(xué)特性
單純皰疹病毒(herpessimplexvirus,hsv)有hsv-1和hsv-2兩個(gè)血清型，均呈球形、直徑為120~150nm，由核心、衣殼、被膜及包膜組成。核心為160kb、分子量約108的雙股dna，衣殼呈二十面體對(duì)稱，外復(fù)一層厚薄不勻的被膜，最外層為典型的脂質(zhì)雙層包膜，上有突起。
hsv基因組可編碼100多種多肽，已知至少有近十種系病毒的晚期蛋白，與病毒感染和破壞細(xì)胞密切相關(guān)，例如：gb、gc、gd、ge、gg、gh等糖蛋白可參與病毒對(duì)宿主細(xì)胞的吸附和穿入;gh能控制病毒從細(xì)胞核膜出芽釋放;gb、gc、gd、gh則誘導(dǎo)細(xì)胞融合，并具有誘生中和抗體(gd最強(qiáng))和細(xì)胞毒作用(hsv糖蛋白均可)。此外，gc是補(bǔ)體c3b受體、ge為fcγ的受體。gg具有型特異性，是hsv-1和hsv-2血清型鑒定的依據(jù)。
hsv對(duì)動(dòng)物和組織細(xì)胞的敏感性廣泛，常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有小鼠、豚鼠、家兔等，多種原代人胚細(xì)胞、二倍體細(xì)胞以及動(dòng)物細(xì)胞有助于hsv的分離培養(yǎng)。hsv感染細(xì)胞后很快導(dǎo)致受染細(xì)胞的病變，表現(xiàn)為細(xì)胞腫大、變圓、折光性增強(qiáng)，可見有核內(nèi)嗜酸性包含體。hsv的增殖周期短，約需8~16小時(shí)，其抵抗力較弱，易被脂溶劑滅活。
二、致病性與免疫性
hsv的感染十分普遍，呈全球性分布。人是hsv唯一的自然宿主，主要通過(guò)直接密切接觸和性接觸傳播。病毒可經(jīng)口腔、呼吸道、生殖道粘膜和破損皮膚等多種途徑侵入機(jī)體，孕婦生殖道皰疹可在分娩時(shí)傳染新生兒。血清學(xué)調(diào)查表明，hsv抗體水平直接與年齡和社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況相關(guān)，在多數(shù)欠發(fā)達(dá)國(guó)家，30歲以上人群hsv-1抗體的陽(yáng)性率為90%;美國(guó)中產(chǎn)階層人群中約有50~60%可檢出hsv-1抗體，而社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況較差的群體則接近90%。初次感染雖多無(wú)臨床癥狀，但常轉(zhuǎn)變?yōu)闈摲腥?。兩種不同血清型hsv的感染部位及臨床表現(xiàn)各不相同，hsv-1主要引起咽炎、唇皰疹、角膜結(jié)膜炎，而hsv-2則主要導(dǎo)致生殖器皰疹。
(一)感染類型
1.急性感染 hsv借助其包膜上的糖蛋白與宿主細(xì)胞表面的受體結(jié)合，進(jìn)而介導(dǎo)病毒包膜與受染細(xì)胞膜的融合。釋放于胞漿的病毒dna通過(guò)核孔轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核，在核內(nèi)合成子代病毒dna和轉(zhuǎn)錄mrna，新病毒裝配后通過(guò)核膜出芽形成包膜，再經(jīng)類似蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的方式由細(xì)胞漿運(yùn)出細(xì)胞。
在hsv感染的細(xì)胞內(nèi)，病毒特異性基因產(chǎn)物受到控制和調(diào)節(jié)。業(yè)已表明有編碼三組病毒多肽的mrna，分別與下列三類病毒多肽的產(chǎn)生有關(guān)：①感染后2~4小時(shí)合成的α或即刻早期(immediateearly,ie)多肽，可能發(fā)揮著病毒轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)作用。②β或早期(early,e)多肽，包括病毒特異性胸腺激酶和dna聚合酶(pol)，因其與宿主細(xì)胞的不同，可作為抗病毒治療的重要靶向。e多肽的合成使ie多肽的合成關(guān)閉，而誘導(dǎo)合成γ或晚期(late,l)多肽。③晚期多肽于病毒感染細(xì)胞后12~15小時(shí)合成，是病毒顆粒的組成成分。病毒感染的局部浸潤(rùn)細(xì)胞初期為中性粒細(xì)胞，繼而出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)。
hsv能夠通過(guò)中間神經(jīng)節(jié)或軸突和神經(jīng)支配的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)傳播，并潛伏于感覺(jué)和自律神經(jīng)節(jié)。由于病毒的傳播發(fā)生于細(xì)胞間，故不受循環(huán)抗體的影響。
2.潛伏感染與復(fù)活感染 通過(guò)共培養(yǎng)技術(shù)證實(shí)，hsv-1潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)、頸上神經(jīng)節(jié)和迷走神經(jīng)節(jié)，偶可潛伏在s2-3背側(cè)感覺(jué)神經(jīng)根;hsv-2則潛伏感染于骶神經(jīng)節(jié)。hsv對(duì)神經(jīng)組織的潛伏感染并不導(dǎo)致細(xì)胞損傷，其基因組大都處于非復(fù)制狀態(tài)，僅少部分與病毒早期(pol和tk)或晚期多肽無(wú)關(guān)的基因表達(dá)。當(dāng)潛伏感染的宿主神經(jīng)軸受損、發(fā)熱或受到外傷(如插管等)、紫外線照射等刺激時(shí)，病毒可被激活并沿神經(jīng)纖維軸索至末梢，從而進(jìn)入神經(jīng)支配的皮膚和黏膜重新增殖，再度引起病理改變，導(dǎo)致局部皰疹的復(fù)發(fā)。
(二)臨床疾病
1.口咽部皰疹 多為hsv-1感染所致，急性感染常發(fā)生于兒童，僅少數(shù)感染者出現(xiàn)臨床癥狀，表現(xiàn)為發(fā)熱、咽痛、口腔黏膜皰疹和潰瘍等。復(fù)活感染常發(fā)生于口唇皮膚與黏膜交界處，初有疼痛、燒灼感，繼后局部出現(xiàn)水皰并破潰形成潰瘍，一周左右病愈。
2.生殖器皰疹 多系hsv-2感染所致，急性感染時(shí)臨床癥狀較重，感染部位出現(xiàn)斑疹或丘疹，進(jìn)而形成水皰、膿皰和潰瘍，可伴有發(fā)熱和淋巴結(jié)腫大等臨床表現(xiàn)，病程約3周。生殖器皰疹易復(fù)發(fā)，但癥狀較輕，甚至無(wú)臨床表現(xiàn)。此類疾病可通過(guò)性接觸傳播。
hsv-2與子宮頸癌的關(guān)系密切，其依據(jù)為：①患過(guò)生殖器皰疹的婦女子宮頸癌的發(fā)生率高;②子宮頸癌患者h(yuǎn)sv-2抗體陽(yáng)性率高;③子宮頸癌組織細(xì)胞內(nèi)可檢出此型病毒的抗原;④細(xì)胞培養(yǎng)中的hsv-2核酸可使地鼠細(xì)胞向癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化。
3.皰疹性角膜結(jié)膜炎 兩型hsv均可引起，以hsv-1為多見。急性和復(fù)活性感染發(fā)生在眼部，表現(xiàn)為樹枝狀角膜炎或角膜潰瘍。重者炎癥波及結(jié)膜基層，導(dǎo)致角膜混濁影響視力。新生兒可在患有hsv-2感染的孕婦分娩時(shí)獲得感染，發(fā)生hsv-2皰疹性結(jié)膜角膜炎或新生兒皰疹。
4.皮膚感染與皰疹性甲溝炎 hsv-1皮膚感染發(fā)生于皮膚破損者，如濕疹、燒傷或外傷，引起皰疹性濕疹、皰疹性甲溝炎等。皰疹性甲溝炎系手指皮膚破損后，hsv感染手指或指甲部位，出現(xiàn)疼痛性皰疹并形成膿皰，常被誤診為細(xì)菌感染。
此外，hsv-1感染尚可感染免疫功能缺陷的個(gè)體，其病變可擴(kuò)散至呼吸道、消化道、腸黏膜等，癥狀更為嚴(yán)重。hsv-1感染引起的散發(fā)性致死性腦炎，病程進(jìn)展快、病死率高。
(三)免疫性
hsv急性感染的臨床癥狀往往比復(fù)發(fā)(復(fù)活)感染嚴(yán)重，這與hsv感染后刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和特異性t細(xì)胞相關(guān)。直接針對(duì)hsv包膜糖蛋白的中和抗體對(duì)宿主具有重要的保護(hù)作用，此類抗體尚可介導(dǎo)adcc，限制早期hsv感染的播散。中和抗體約在感染后1周左右出現(xiàn)于血清中，3~4周達(dá)高峰且持續(xù)多年。
hsv感染第二周檢測(cè)到的特異性tc細(xì)胞，可在病毒復(fù)制完成之前破壞受染的宿主細(xì)胞。hsv-1先入感染能夠?qū)筯sv-2的再感染或減輕其引起的損傷。此外，在免疫缺陷的患者，尤其是細(xì)胞免疫功能低下者，常引起嚴(yán)重的hsv復(fù)活感染，這可能與病毒釋放時(shí)間延長(zhǎng)和損傷的持續(xù)存在相關(guān)。
三、微生物學(xué)檢查法
1.病毒分離培養(yǎng) 病毒分離培養(yǎng)是確診hsv感染的“金”標(biāo)準(zhǔn)。水皰液、唾液、腦脊液、眼角膜刮取物、陰道棉試子等標(biāo)本接種人胚腎、人羊膜或兔腎等易感細(xì)胞，也可接種于雞胚絨毛尿囊膜和乳鼠或小白鼠腦內(nèi)，均可獲較高的分離率。hsv引起的cpe常在2~3天后出現(xiàn)，細(xì)胞可呈腫脹、變圓、折光性增強(qiáng)和形成融合細(xì)胞等病變特征。hsv-1和hsv-2的單克隆抗體、hsv型特異性核酸探針等，可通過(guò)免疫熒光或核酸雜交法等用于病毒鑒定和分型。
2.快速診斷 將宮頸粘膜、皮膚、口腔、角膜等組織細(xì)胞涂片后，用特異性抗體作間接免疫熒光或免疫組化染色法檢測(cè)病毒抗原;wright-giemsa染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體及多核巨細(xì)胞，可考慮hsv感染;將皰疹皰液進(jìn)行電鏡負(fù)染可迅速確診。
原位核酸雜交和pcr法可用于檢測(cè)hsvdna。pcr產(chǎn)物的特異性鑒定選用southernblot法，腦脊液pcr擴(kuò)增被認(rèn)為是診斷皰疹性腦炎的最佳手段。此外，dna酶切圖譜也可作hsv鑒定和型別分析。
hsv抗體測(cè)定對(duì)臨床診斷意義不大，僅用于流行病學(xué)調(diào)查，常用方法為elisa。
四、防治原則
避免與患者接觸或給易感人群注射特異性抗體，可減少hsv傳播的危險(xiǎn)。無(wú)癥狀帶毒者的唾液、尿道或生殖道是hsv-2的重要載體，一旦出現(xiàn)損傷應(yīng)避免性接觸。無(wú)環(huán)鳥苷、valacyclover、famcicclover能夠抑制hsv感染的復(fù)發(fā)，但常規(guī)抗病毒藥物的作用是直接針對(duì)病毒dna多聚酶的，故難以清除潛伏狀態(tài)的病毒。由于新生兒感染的危險(xiǎn)性高，要特別注意預(yù)防分娩過(guò)程中病毒的傳播。在某些情況下(如羊膜未破時(shí))可采取剖腹產(chǎn)，以減少新生兒與病損生殖器的接觸。分娩后給新生兒注射特異性抗體或丙種球蛋白也可作為緊急預(yù)防措施。近年來(lái)應(yīng)用的重組hsv-2疫苗，不能減少已感染有hsv-2患者的復(fù)發(fā)率，但尚不明確對(duì)原發(fā)感染是否有效，幾種hsv疫苗的研究正處在不同的發(fā)展階段。（實(shí)習(xí)編輯：小雨）
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