免疫指標(biāo)不是肝功能的直接指標(biāo),但由于肝臟承擔(dān)了體內(nèi)蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)的合成與代謝,因此能直接或間接地影響與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫狀態(tài),通過對血清ig及補(bǔ)體的檢測,可在一定程度上反映受檢者肝臟的疾病和損傷。免疫免疫功能的檢測主要包括體液免疫(免疫球蛋白、補(bǔ)體)和細(xì)胞免疫的測定。
1.免疫球蛋白和補(bǔ)體測定 肝臟不是兔疫球蛋白的合成場所,但對血清中免疫球蛋白含量起重要的調(diào)節(jié)作用。這種調(diào)節(jié)作用表現(xiàn)在:影響腸道內(nèi)抗原物質(zhì)的吸收及處理、通過庫普弗細(xì)胞對抗原呈現(xiàn)特殊遞呈作用/卜體靜脈側(cè)支循環(huán)hj將腸道來源的抗原直接暴露在全身免疫系統(tǒng)而誘導(dǎo)機(jī)體大量抗體的產(chǎn)牛等,肝病是導(dǎo)致外周血免疫球蛋白非特異仕升高的六大病種之一。急仕肝炎多為lgm1高(卜一1(大廣 慢性肝炎kg、ka皆升高,以k(z為主。肝硬化則k(i、18a、18m皆升高.f巴以lga it高為顯著。肝癌則lgm降低,lga升高最明顯;當(dāng)然以k這些變化是相對而言.并下是絕對的。
補(bǔ)體與肝臟的關(guān)系更為密切,部分補(bǔ)體及其抑制h子山肝臟合成.肝臟的感染和炎癥后應(yīng)。刺激機(jī)體免疫系統(tǒng).導(dǎo)致血清總杯體is件及其他補(bǔ)作成5肝內(nèi)含量增加.這種現(xiàn)象可見于項(xiàng)后較好的急性病毒性肝炎早期。當(dāng)肝實(shí)質(zhì)受到嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),補(bǔ)體成分的合成相應(yīng)減少,這種減少往往在肝病的晚期,同時(shí)伴有顯著的肝功能受損 此外任何造成肝實(shí)質(zhì)損傷與肝臟血流動力學(xué)變化均叮導(dǎo)致循環(huán)免疫復(fù)合物在外周血中的積聚.其結(jié)果導(dǎo)致對補(bǔ)體的過量激活,使血清中補(bǔ)體含量消耗性降低,急性降低多見于急性重癥肝炎,慢性消耗性減低主要發(fā)生在多種補(bǔ)體成分自身免疫。什疾病、自身免疫性肝炎、肝硬化及其他原因?qū)е碌母尾⊥砥凇?/p>
2.細(xì)胞免疫功能測定 包括體內(nèi)法和體外法.兩種方法在基礎(chǔ)免疫中已有詳述,這衛(wèi)只將最新的檢查力法—一流人細(xì)胞儀檢查法作些介紹。
流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,fcm)是 20世紀(jì) 80年代發(fā)展起來的一壩利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析的新技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)集激光術(shù)、微電腦、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞色素化學(xué)于一體,形成了快速、準(zhǔn)確的分析和細(xì)胞分選技術(shù)方法。fcm在臨床和基礎(chǔ)研究中的價(jià)值主要體現(xiàn)于免疫表型分析、dna含量分析和細(xì)胞分選三個(gè)方面。其中免疫表型分析在細(xì)胞免疫功能測定中起著重要作用。原理是用細(xì)胞表面特異性單克隆抗體與細(xì)胞作用,再利用熒光結(jié)合的第二抗體與之作用。通過抗原抗體反應(yīng),使陽性細(xì)胞標(biāo)上熒光,此為間接標(biāo)記法;或?qū)⑻禺愋詥慰瓜葮?biāo)記上熒光再直接與細(xì)胞結(jié)合發(fā)光,此為直接標(biāo)記法。當(dāng)細(xì)胞流經(jīng)流式細(xì)胞儀,激光束(488urn)對高速通過的細(xì)胞流照射,使熒光染料產(chǎn)生不同波長的散射光,光信號收集后經(jīng)由pmt(光電倍增管)放大并加以分析處理,在短時(shí)內(nèi)可獲取細(xì)胞大小、核質(zhì)比、熒光強(qiáng)度和陽性百分比等數(shù)據(jù),較之熒光顯微鏡分析具有客觀、快速、信息量大,統(tǒng)計(jì)處理準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用fcm對細(xì)胞免疫功能的檢測主要用于:
(1)對細(xì)胞分群和細(xì)胞亞群的分析 利用cd45/cd14可以分出外周血中的白細(xì)胞和單核細(xì)胞,在白細(xì)胞內(nèi)利用 cd3、cd19、cd20、cd3一/(cd16+56)十等標(biāo)記進(jìn)一步可分出t、b淋巴細(xì)胞和nk細(xì)胞等。在t細(xì)胞內(nèi)又有cd4/cds標(biāo)志的t輔助/誘導(dǎo)和t抑制/殺傷亞群,利用 cd4/cd29、cds/cd28標(biāo)志可以將t4、ts進(jìn)一步分出谷亞群。
(2)檢測淋巴細(xì)胞的活化cd3/hla-dr、cd3/cd25、cd69等都是活化t淋巴細(xì)胞的特異性標(biāo)記,另有c17單抗是活化的細(xì)胞毒t淋巴細(xì)胞的標(biāo)志物。其比值的改變對病情監(jiān)測,療效判斷有重要的指導(dǎo)意義。
(3)一些特殊的標(biāo)志如cd4/cd8比值是aids、自身免疫性疾病病程監(jiān)測的重要指標(biāo)。q
常用免疫表型分析單抗及正常值見表分3。
表5-3 常用外周血表型分析值 (+/-)表示加減
cd分類 意義 正常值(百分?jǐn)?shù))x(+/-)2s
cd3 總t淋巴細(xì)胞 65.86(+/-)9.60
cd2 花環(huán)形成細(xì)胞 77.46(+/-)9.27
cd4 t輔助/t誘導(dǎo)亞群37.53(+/-)8.91
cd4+/cd29- 輔助性t細(xì)胞 21.22(+/-)8.98
cd4+/cd29+ 輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群 16.86(+/-)5.30
cd29 輔助和抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群 59.45(+/-)12.49
cd8 t抑制/t殺傷亞群 28.01(+/-)10.13
cd8+/cd28- t抑制細(xì)胞亞群 16.96(+/-)9.35
cd8+/cd28+ t殺傷細(xì)胞亞群 11.73(+/-)3.44
cd3-/cd(16+56)+ 自然殺傷細(xì)胞 16.27(+/-)8.50
cd19 總b細(xì)胞 11 .74(+/-)3.37
cd25 il-2ra鏈 14.34(+/-)0.14
cd4/cd8比值1.53(+/-)0.71153十0 71
外周血取自上海市46名職員獻(xiàn)血者。
總之,肝硬化時(shí)山有以廠化度學(xué)改變:細(xì)胞免疫檢查則發(fā)現(xiàn)半數(shù)以上患者t淋巴細(xì)胞數(shù)低于正常。t細(xì)胞及其亞群的單克隆抗體檢測,結(jié)果常示cd3降低、cd4略低、cd8無多大改變,cd4/igm均可升高。一般以 igg增高為最顯著,與r-球蛋白升高相平行。lgg增高的機(jī)制系由于腸原性多種抗原物質(zhì)經(jīng)吸收至肝臟后,不能被肝臟庫普弗細(xì)胞吞噬和降解,或通過門脈側(cè)支循環(huán)直接進(jìn)入體循環(huán),引起的免疫反向。此外,部分患者環(huán)可出現(xiàn)非特異性自身抗體,如抗核抗體、平滑肌抗體等。(實(shí)習(xí)編輯:王媛)
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