文：科志康

基因療法用于治療一些難以治療的遺傳疾病，其潛力非常誘人，但現(xiàn)在有一種產(chǎn)品被懷疑會引發(fā)嚴(yán)重的安全問題。

（左圖是SCID患者-泡泡男孩，因為免疫系統(tǒng)嚴(yán)重受損，必須生活在無菌“泡泡”中；右圖是攜帶正確基因拷貝的載體-來源GSK）

10月30日，Orchard Therapeutics公司表示，其基因療法Strimvelis被懷疑導(dǎo)致了一名患者的白血病，該療法于2016年獲得EMA批準(zhǔn)，用于治療罕見的遺傳性ADA-SCID。ADA-SCID是一種以制造腺苷脫氨酶（ADA）酶的基因突變?yōu)闃?biāo)志的疾病，ADA酶對維持正常白細(xì)胞至關(guān)重要。ADA-SCID患者的免疫系統(tǒng)功能紊亂，如果不進行有效干預(yù)，患者壽命不超過兩年。

Orchard說：“初步研究結(jié)果表明，這一診斷可能與用Strimvelis治療相關(guān)聯(lián)的插入性事件所致。”目前正在調(diào)查是否確實存在因果關(guān)系。

自2016年獲得歐盟批準(zhǔn)后，原開發(fā)商葛蘭素史克公司（GlaxoSmithKline，GSK）僅給16名患者進行了Stimvelis治療。這名患白血病的患者顯然是在2016年一個葛蘭素史克同情用藥計劃中接受了治療。Orchard說，在調(diào)查完成之前，不會有更多患者接受治療。這種藥從未在美國獲得批準(zhǔn)。

2018年Orchard從GSK購買了Strimvelis，它為找不到匹配干細(xì)胞捐獻者的患者提供了一個選擇。其工作原理是用功能性ADA基因編輯患者自己的造血干細(xì)胞。然后把這些細(xì)胞回輸入患者骨髓中，發(fā)育成熟后產(chǎn)生正常的ADA蛋白。

該療法使用一種γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒作為功能性ADA基因的載體。問題是，逆轉(zhuǎn)錄病毒可以將自己的基因信息整合到人類基因組中，引起意外突變，從而導(dǎo)致癌癥。它是一種已知的基于γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的基因治療的危險因素，在EMA批準(zhǔn)中被描述為Stimvelis的重要潛在風(fēng)險之一。

除了Strimvelis，Orchard還開發(fā)了OTL-101，它使用慢病毒將ADA基因的功能拷貝插入患者細(xì)胞。該藥目前正在進行注冊試驗，并已獲得FDA的突破性和孤兒藥指定。Orchard說，Orchard的所有候選基因治療藥物都使用慢病毒載體，這些載體是“專門設(shè)計用來避免給藥后發(fā)生插入性癌變”的。目前還沒有報告關(guān)于慢病毒載體干細(xì)胞基因治療的危險基因插入。

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除骨髓移植外，能用于治療ADA-SCID的藥物：

1) 1990年獲批的Adagen（pegademase bovine）聚乙二醇修飾的來源于牛的腺苷脫氨酶，用于治療伴有腺苷脫氨酶缺乏的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病。

2) 2018年10月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了Leadiant Biosciences公司的Revcovi (elapegademase-lvlr)，一種重組腺苷脫氨酶，用于治療ADA-SCID兒童和成人患者。

擴展閱讀2：

筆者整理了幾種常用于細(xì)胞和基因療法的病毒載體及其在上市藥物中的實際運用：

1、腺相關(guān)病毒：腺相關(guān)病毒（AAV）屬于微小病毒科依賴病毒屬,是目前發(fā)現(xiàn)的一類結(jié)構(gòu)最簡單的單鏈DNA（ssDNA）缺陷型病毒，需要輔助病毒（通常為腺病毒）參與復(fù)制，重組腺相關(guān)病毒載體源于非致病的野生腺相關(guān)病毒，安全性好、宿主細(xì)胞范圍廣(分裂和非分裂細(xì)胞)、免疫源性低，在體內(nèi)表達(dá)外源基因時間長（6個月以上），在世界范圍內(nèi)的基因治療和疫苗研究中得到廣泛應(yīng)用。目前還未發(fā)現(xiàn)AAV引起疾病，也不會引發(fā)主要的免疫系統(tǒng)反應(yīng)。

上市藥物：目前有三款，分別是UniQure公司的Glybera（AAV1），Spark Therapeutics公司（后被羅氏收購）的Luxturna（AAV2）和諾華（AveXis）的Zolgensma（AAV9）。

2、腺病毒：腺病毒（AdV）是無包膜的雙鏈DNA（dsDNA），也是用于人類的第一種病毒基因傳遞載體，一些種類的腺病毒在人體中毒力低或無毒力，并且對于分裂和非分裂細(xì)胞均具有高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，腺病毒不能整合到宿主基因組，使其具有非常低的插入突變風(fēng)險，也因為不能整合入宿主細(xì)胞，所以只能短暫表達(dá)（3周），且腺病毒某些自身抗原的表達(dá)會引起人體免疫反應(yīng)，阻止其重復(fù)轉(zhuǎn)導(dǎo)。腺病毒載體已經(jīng)被用于溶瘤治療以及疫苗抗原的表達(dá)。

上市藥物：全球首個上市的溶瘤病毒藥物為我國的安柯瑞（Oncorine，重組人5型腺病毒注射液）。

3、慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒都屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，為單鏈RNA（ssRNA），能隨機整合至宿主細(xì)胞染色體內(nèi)并穩(wěn)定遺傳。區(qū)別在于慢病毒載體病毒原型是HIV-1(人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)，其結(jié)構(gòu)和基因組比其他逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)雜，容量大。

上市藥物：美國已經(jīng)上市的三個靶向CD19的CAR-T藥物，諾華的Kymriah采用慢病毒作為載體；吉利德（Kite）的Yescarta和Tecartus用的是復(fù)制缺陷γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體PG13-CD19-H3。